Isolement et activité antiproliférative de la lectine de Lotus corniculatus envers des lignées cellulaires tumorales humaines

Référence : Phytomedicine 2013. — PMID 24055517 Type : étude in vitro (antiproliférative) · Plante : Lotier corniculé · Propriété → Cancer Accès : 🔒 payante → résumé (abstract) traduit (texte intégral non disponible gratuitement). Fidélité : traduction fidèle du résumé publié par les auteurs.


Résumé (traduction française)

L’objectif de l’étude était d’examiner l’activité anticancéreuse d’une lectine isolée à partir de graines de Lotus corniculatus. Une lectine tétramérique de 70 kDa, spécifique du galactose, a été purifiée au moyen d’un protocole simple de purification en deux étapes comprenant une chromatographie d’affinité sur AF-BlueHC650M et une filtration sur gel Sephadex G-100. La lectine a été adsorbée sur AF-BlueHC650M et désorbée à l’aide de NaCl 1 M dans le tampon initial. La filtration sur gel Sephadex G-100 a produit un pic majeur d’absorbance qui a donné deux bandes de 15 kDa et 20 kDa en SDS-PAGE. L’activité d’hémagglutination était entièrement préservée lorsque la température se situait entre 20 et 60 °C. Cependant, une réduction drastique de l’activité survenait à des températures supérieures à 60 °C. L’activité d’hémagglutination complète était conservée entre pH 4 et 12. Au-delà, aucune activité n’était observée à un pH supérieur à 13. L’hémagglutination de la lectine était inhibée par le D-galactose. La lectine présentait une forte activité antiproliférative envers les cellules cancéreuses leucémiques humaines THP-1, suivies des cellules de cancer du poumon HOP62 et des cellules HCT116, avec des CI50 respectives de 39 μg/ml, 50 μg/ml et 60 μg/ml. L’analyse par cytométrie en flux a montré une augmentation du pourcentage de cellules en phase sub-G0/G1, confirmant que la lectine de Lotus corniculatus induisait l’apoptose. Les observations morphologiques ont montré que les cellules THP-1 traitées par la lectine de Lotus corniculatus (LCL) présentaient des caractéristiques manifestes d’apoptose, telles qu’une fragmentation nucléaire, l’apparition de corps apoptotiques délimités par une membrane et une fragmentation de l’ADN. La lectine de Lotus corniculatus (LCL) inhibait efficacement la migration cellulaire de manière dépendante de la dose, comme l’indiquait le test de cicatrisation.


Résumé original (anglais)

The objective of the study was to investigate the anti cancer activity of a lectin isolated from Lotus corniculatus seeds. A tetrameric 70kDa galactose specific lectin was purified using two step simple purification protocol which involved affinity chromatography on AF-BlueHC650M and gel filtration on Sephadex G-100. The lectin was adsorbed on AF-BlueHC650M and desorbed using 1M NaCl in the starting buffer. Gel filtration on Sephadex G-100 yielded a major peak absorbance that gave two bands of 15kDa and 20kDa in SDS PAGE. Hemagglutination activity was completely preserved, when the temperature was in the range of 20-60°C. However, drastic reduction in activity occurred at temperatures above 60°C. Full hemagglutination activity was retained at ambient pH 4-12. Thereafter no activity was observed above pH 13. Hemaglutination of the lectin was inhibited by d-galactose. The lectin showed a strong antiproliferative activity towards human leukemic (THP-1) cancer cells followed by lung cancer (HOP62) cells and HCT116 with an IC50 of 39μg/ml and 50μg/ml and 60μg/ml respectively. Flow cytometry analysis showed an increase in the percentage of cells in sub G0G1 phase confirming that Lotus corniculatus lectin induced apoptosis. Morphological observations showed that Lotus corniculatus lectin (LCL) treated THP-1 cells displayed apparent apoptosis characteristics such as nuclear fragmentation, appearance of membrane enclosed apoptotic bodies and DNA fragmentation. Lotus corniculatus lectin (LCL) effectively inhibits the cell migration in a dose dependent manner as indicated by the wound healing assay.


Cette étude in vitro porte sur une lectine isolée des graines de Lotus corniculatus. Elle évalue son activité antiproliférative envers les lignées tumorales humaines THP-1, HOP62 et HCT116, ainsi que ses effets sur l’apoptose et la migration cellulaire. La lectine présente des CI50 respectives de 39, 50 et 60 μg/ml, induit des caractéristiques d’apoptose dans les cellules THP-1 et inhibe la migration cellulaire de manière dépendante de la dose. Ces résultats reposent uniquement sur le résumé publié.

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