Référence : BioMed Research International 2015. — PMC4341861 · DOI 10.1155/2015/286817 Type : Article de recherche (essai in vitro + essai clinique randomisé in vivo + analyse phytochimique) · Plante : Plantain lancéolé · Propriété → Antimicrobien Accès : ⭐ libre → texte intégral traduit Fidélité : traduction intégrale et fidèle du texte des auteurs. Appels [n] omis ; figures/tableaux « [ ] ».
Introduction. Les extraits de plantes pourraient constituer des traitements alternatifs adaptés contre la carie. Objectifs. Étudier les effets antimicrobiens in vitro et in vivo d’une tisane de Plantago lanceolata (à partir des fleurs et des feuilles) sur les bactéries cariogènes, et identifier les principaux constituants de la plante P. lanceolata. Matériels et méthodes. La CMI (concentration minimale inhibitrice) et la CMB (concentration minimale bactéricide) contre les bactéries cariogènes ont été déterminées pour la tisane de P. lanceolata. Une étude clinique contrôlée randomisée a ensuite été menée. Le Groupe A a reçu la consigne de se rincer la bouche avec un bain de bouche à base de P. lanceolata, et le Groupe B a reçu un bain de bouche placebo, pendant sept jours. La colonisation salivaire par les streptocoques et les lactobacilles a été étudiée avant le traitement puis aux quatrième et septième jours. Enfin, la tisane de P. lanceolata a été analysée pour sa teneur en polyphénols, et les principaux composés phénoliques ont été identifiés. Résultats et discussion. Les tisanes de P. lanceolata montrent une bonne activité antimicrobienne in vitro. Le test in vivo a montré que les sujets du Groupe A présentaient une diminution significative des streptocoques par rapport au Groupe B. L’analyse phytochimique a révélé la présence de flavonoïdes, de coumarines, de lipides, d’acides cinnamiques, de lignanes et de composés phénoliques dans les infusions de P. lanceolata. Conclusions. L’extrait de P. lanceolata pourrait représenter un agent anticariogène naturel par un effet antimicrobien et pourrait être utile comme mesure d’appoint pour contrôler la prolifération de la flore cariogène.
Bien que la prévalence de la carie dentaire ait lentement diminué dans de nombreux pays développés, cette maladie continue d’être un problème majeur de santé publique dans les pays industrialisés et est devenue un problème de santé publique émergent dans les pays en développement.
Diverses mesures préventives ont été tentées pour contrôler la survenue de la carie dentaire, telles que les fluorures topiques ou systémiques, les scellements de sillons et les approches diététiques, mais elles ne suffisent pas à contrôler la maladie, qui a une étiologie multifactorielle.
Des bactéries appartenant à différentes espèces de Streptococcus et de Lactobacillus jouent un rôle prépondérant dans le développement et la progression de la carie. Comme ces micro-organismes sont les facteurs les plus importants dans le processus carieux, réduire leur niveau dans la cavité buccale fournira une justification supplémentaire pour la prévention de la carie dentaire.
La chlorhexidine est un agent antimicrobien cliniquement efficace contre un large éventail de micro-organismes cariogènes. Cependant, l’utilisation de la chlorhexidine pour la prévention de la carie a été un sujet controversé parmi les enseignants et les cliniciens en dentisterie, en raison de plusieurs effets secondaires indésirables, notamment la formation d’une coloration extrinsèque sur la dent et la langue et l’émergence d’une résistance bactérienne. Dans ce contexte, des traitements antimicrobiens alternatifs, tels que les extraits de composés antibactériens issus de plantes, réduisant les comptages salivaires de la microflore cariogène, peuvent être proposés pour contrôler cette maladie.
Le genre Plantago (Plantaginaceae) comprend environ 275 espèces à distribution cosmopolite. Des études récentes ont confirmé que certaines espèces de Plantago possèdent des activités antivirale, anti-inflammatoire et antioxydante considérables. Des études phytochimiques ont également montré que le genre Plantago contient une grande quantité de composés phénoliques (flavonoïdes et tannins). En particulier, les composés phénoliques semblent jouer un rôle potentiel dans le contrôle de la croissance bactérienne et pourraient prévenir la carie dentaire, en diminuant la croissance et la virulence de la flore buccale pathogène. Une étude récente a rapporté que les extraits méthanol/eau de P. lanceolata sont riches en acides phénoliques, les dérivés de l’acide benzoïque — hydroxybenzoate et 3,4,5-trihydroxybenzoate (acide gallique) — étant les plus fortement représentés.
Les infusions chaudes (tisanes) représentent de loin le mode de consommation le plus répandu des plantes auxquelles des propriétés médicinales ont été reconnues en médecine traditionnelle. Tsai et al. (2008) ont démontré que plusieurs plantes couramment utilisées en tisane à Taïwan présentaient des propriétés anticariogènes et anti-inflammatoires. Selon l’Agence européenne des médicaments (EMA), la tisane préparée à partir des feuilles de P. lanceolata est utilisée dans les pays européens comme émollient pour le traitement local des irritations buccales ou pharyngées et est considérée comme une préparation sûre sans contre-indications connues. Dans cette étude, une évaluation in vitro de l’activité antimicrobienne de la tisane de P. lanceolata contre des souches bactériennes cariogènes des espèces Streptococcus et Lactobacillus isolées à partir d’échantillons cliniques a été réalisée ; ensuite, un bain de bouche préparé avec une infusion de feuilles et de fleurs séchées de P. lanceolata a été testé in vivo pour son efficacité à réduire les comptages salivaires de la microflore cariogène. Enfin, la tisane de P. lanceolata a été analysée pour sa teneur en polyphénols, et les principaux composés phénoliques ont été identifiés.
Les étalons de composés phénoliques ont été achetés chez Sigma Aldrich (Milan, Italie). Tous les autres produits chimiques et solvants ont été achetés chez Fluka (Saint-Quentin Fallavier, France) en qualité analytique ou HPLC et ont été utilisés tels que reçus.
P. lanceolata a été récolté en juin 2012 dans le Parc royal de Capodimonte, Naples, Italie. Le spécimen de référence (n° 0134) a été préparé et identifié dans notre laboratoire et déposé à l’Herbier du Jardin botanique de l’Université « Federico II » à Naples, Italie.
Les fleurs, feuilles et racines de P. lanceolata ont été séchées séparément à 55 °C pendant 48 h dans une étuve Carlo Erba E.28 CL.1 puis broyées en une poudre grossière. Un total de 2 g de poudre de chaque partie de la plante a été mis en suspension dans 20 mL d’eau Amorosa (eau minérale plate, pauvre en sodium et idéale pour la préparation des aliments pour bébés et jeunes enfants) à 100 °C pendant 3 min. La préparation a été infusée pendant 8 min, puis refroidie à température ambiante, filtrée et évaporée jusqu’à siccité complète.
Pour préparer le bain de bouche, 200 g de matériel pulvérisé (fleurs et feuilles) ont été mis en suspension dans 2,0 L d’eau Amorosa selon la même procédure que celle décrite précédemment. La préparation a été filtrée, placée dans un récipient en verre stérilisé de 3,0 L et conservée à 4 °C avant utilisation.
Les souches bactériennes utilisées pour les tests étaient L. casei, S. bovis, S. mutans, S. mitis, S. parasanguinis, S. viridans et S. sobrinus. Les souches provenaient de prélèvements cliniques obtenus à l’Unité de diagnostic de bactériologie et de mycologie de l’Université de Naples « Federico II ». Les bactéries ont été cultivées sur des boîtes de gélose Trypticase Soja avec 5 % de sang de mouton (TSS ; Becton Dickinson, USA) à 37 °C sous 5 % de CO₂ pendant 48 h.
La concentration minimale inhibitrice (CMI) a été mesurée par la méthode standard de microdilution en plaques de polystyrène à 96 puits, dans un milieu d’infusion cœur-cervelle (BHI). L’inoculum de départ était de 5 × 10⁵ UFC mL⁻¹, et les concentrations finales de l’infusion de P. lanceolata s’échelonnaient de 4 à 0,025 mg mL⁻¹. Pour déterminer la concentration minimale bactéricide (CMB), 50 μL de suspension bactérienne provenant des puits contenant des concentrations d’extrait égales ou supérieures à la CMI ont été inoculés dans 5 mL de milieu BHI stérile et incubés pendant 24 h à 37 °C sous une atmosphère de 5 % de CO₂.
Nous avons choisi deux lignées cellulaires humaines, l’une p53 négative et l’autre p53 positive.
La lignée p53-nulle U937 (lymphome monocytaire leucémique humain) et la lignée isogénique p53-positive TK6 (lymphoblaste humain) ont été obtenues auprès de l’American Type Culture Collection (Rockville, MD). Les deux lignées cellulaires ont été cultivées dans du milieu Dulbecco’s Modified Eagle Medium, 2 mM de l-glutamine, 100 μg/mL de streptomycine, 100 unités/mL de pénicilline, et 10 % de sérum de veau fœtal (FCS). Tous les milieux et réactifs de culture cellulaire ont été achetés chez Life Technologies (San Giuliano Milanese, Italie).
La viabilité cellulaire a été mesurée à l’aide du Cell Proliferation Kit II (XTT, Roche, Milan, Italie). Ce test est basé sur le clivage du sel de tétrazolium jaune XTT pour former un colorant formazan orange par les cellules métaboliquement actives ; par conséquent, cette conversion ne se produit que dans les cellules viables.
Les extraits de plante ont été fournis à notre laboratoire dans les solvants d’extraction correspondants, tous à une concentration nominale de 50 mg/mL. Les extraits ont été séchés sous vide et redissous dans du DMSO à 10 % dans l’eau. Les échantillons ont été conservés à −30 °C jusqu’à utilisation. Avant les mesures, les échantillons ont été ramenés à température ambiante sous agitation et ajoutés aux milieux de culture dans un rapport de 1 à 10. En détail, 90 μL de suspensions de cellules U937 ou TK6 (contenant ~1 × 10⁴ cellules en milieu complet) ont été ensemencés dans des plaques à 96 puits. Ensuite, 10 μL de chaque extrait (50 mg/mL dans du DMSO à 10 %) ont été ajoutés à chaque puits de sorte que la concentration finale d’extrait soit de 5 mg/mL, tandis que la teneur en DMSO était réduite à 1 %. Les cellules ont été incubées dans ces conditions à 37 °C pendant 24 h sous atmosphère de 5 % de CO₂. Des échantillons en triplicat ont été préparés pour chaque condition individuelle. Comme témoin positif de cytotoxicité, nous avons utilisé le Triclosan à faible concentration (0,03 %, comparativement aux 3 % utilisés dans les dentifrices). Ce composé synthétique est un polychloro-phénoxy phénol doté de propriétés antibactériennes et antifongiques. Pour ces raisons, il est actuellement largement utilisé en hygiène buccale comme additif des dentifrices pour prévenir la gingivite.
L’étude clinique a été menée sur un échantillon composé de quarante-quatre adolescents (24 garçons et 20 filles) recrutés au Département de dentisterie pédiatrique de l’Université de Naples « Federico II », Italie, âgés de 12 à 18 ans.
Les critères d’inclusion étaient un bon état de santé général (ASA I : personne en bonne santé ; ASA II : maladie systémique légère) et un accord pour se conformer aux procédures de l’étude.
Les sujets ayant utilisé des antibiotiques ou des bains de bouche au cours des 14 jours précédant le début de l’étude ont été exclus.
Seuls 2 sujets sur les 44 ont été exclus pour cette raison. Cependant, pendant la période de recherche, 2 sujets ont choisi de mettre fin à leur participation ; ainsi, 40 sujets ont terminé l’intégralité du protocole. La participation à l’étude était volontaire. Tous les parents ont donné leur consentement éclairé écrit après avoir reçu des explications orales et écrites du protocole expérimental et des objectifs de l’étude. Le protocole a été approuvé par le Comité d’éthique de l’École de dentisterie de l’Université de Naples « Federico II », Italie.
Une étude clinique contrôlée randomisée a été menée. Les sujets ont été répartis en 2 groupes de 20 sujets respectivement (Groupe A et Groupe B). Les patients ont été assignés au hasard aux groupes test et témoin à l’aide d’une randomisation par blocs à partir d’une liste générée par ordinateur.
Les comptages salivaires de S. mutans et L. casei ont été estimés à l’aide d’un test au fauteuil (chair-side) comportant 2 surfaces de gélose. La gélose bleue mitis-salivarius avec bacitracine a été utilisée pour détecter la présence de streptocoques, tandis que le milieu de culture clair, la gélose Rogosa, a été utilisé pour évaluer celle des lactobacilles.
Aucune restriction alimentaire particulière n’a été imposée aux sujets, et aucun brossage des dents n’était autorisé pendant au moins 1 h après le déjeuner et le dîner. Tous les sujets ont été encouragés à maintenir leurs habitudes normales d’hygiène buccale. Tous les sujets ont reçu la même brosse et le même dentifrice pour l’hygiène buccale quotidienne.
La salive a été inoculée sur une lame immergeable (dip slide) avec des milieux sélectifs pour les streptocoques et les lactobacilles. Après ajout d’un comprimé de NaHCO₃ dans le tube, les lames immergeables ont été immédiatement cultivées à 37 °C pendant 48 h. Le comprimé libère du CO₂ au contact de l’humidité, créant des conditions favorables à la croissance bactérienne.
Les colonies ont été identifiées à l’aide d’un stéréomicroscope à grossissement ×10, et la densité de culture (UFC/mL) a été comparée visuellement à l’aide d’une charte fournie par le fabricant. Les colonies bactériennes ont été classées comme faibles (< 10⁵ UFC/mL de salive) ou élevées (≥ 10⁵ UFC/mL).
Deux formulations différentes de bain de bouche ont été préparées.
(1) Bain de bouche expérimental (Groupe A) : un bain de bouche expérimental a été préparé avec une infusion de feuilles et de fleurs de P. lanceolata, comme décrit précédemment.
(2) Bain de bouche placebo (Groupe B) : le bain de bouche placebo a été préparé avec de l’eau Amorosa, colorée avec un colorant alimentaire.
Plan expérimental. Pendant la période expérimentale, après le prélèvement du premier échantillon de salive (T0), tous les participants du Groupe A ont été invités à se rincer avec 10 mL du bain de bouche expérimental ; en revanche, les participants du Groupe B ont reçu la consigne de se rincer avec 10 mL d’un bain de bouche placebo qui ne contenait pas de substances phénoliques, pendant 60 secondes après avoir effectué l’hygiène buccale, 3 fois par jour (après le petit-déjeuner, après le déjeuner et avant le coucher) pendant 7 jours.
Aux 4ᵉ (T1) et 7ᵉ (T2) jours de traitement, des échantillons salivaires supplémentaires ont été prélevés et immédiatement incubés pour calculer la densité (UFC/mL) de S. mutans et L. casei pour chaque sujet.
Analyse statistique. À la fin des traitements, les données ont été traitées à l’aide du logiciel Statistical Package for Social Sciences (version 10.0, SPSS Inc., Chicago, Illinois, USA). Une analyse de régression logistique binaire a été réalisée. Le seuil de signification statistique a été fixé à P < 0,05.
Des infusions de plantes entières de P. lanceolata et de parties séparées (fleurs, feuilles et racines) ont été soumises à différents tests chimiques pour détecter la présence de flavonoïdes, de coumarines, de lipides et d’acides cinnamiques, et de tannins.
La chromatographie sur colonne (CC) a été réalisée sur du Merck Kieselgel 60 (230–400 mesh). La HPLC a été réalisée sur un Shimadzu LC-10AD utilisant un détecteur UV-VIS Shimadzu RID-10A. Une HPLC semi-préparative a été réalisée à l’aide d’une colonne RP18 (LiChrospher 10 μm, 250 × 10 mm i.d., Merck) avec un débit de 1,2 mL min⁻¹, en utilisant un volume d’injection de 200 μL et un mélange binaire d’eau/acide formique 0,1 % (99 : 1) et de méthanol (solvants A et B, respectivement). Le gradient était le suivant : 0 min, 70 % A/30 % B, atteignant 35 % A/65 % B après 12 min, puis atteignant 100 % B après 25 min, ce qui a été maintenu pendant 12 min. Un temps d’équilibrage de 10 min a été utilisé entre les analyses.
Les spectres RMN ¹H et ¹³C ont été enregistrés sur un instrument RMN Varian INOVA-500 (¹H à 499,6 MHz et ¹³C à 125,62 MHz), référencés avec des solvants deutérés (CDCl₃ ou CD₃OD) à 25 °C. Les corrélations hétéronucléaires détectées par proton ont été mesurées à l’aide d’une cohérence hétéronucléaire à quantum unique en gradient (HSQC), optimisée pour ¹Jᴴᶜ = 155 Hz, et d’une cohérence hétéronucléaire à liaisons multiples en gradient (HMBC), optimisée pour ⁿJᴴᶜ = 8 Hz.
Les spectres de masse ont été obtenus à l’aide d’un spectromètre HP 6890 équipé d’un détecteur MS 5973 N. La HR-ESI-MS/MS a été réalisée à l’aide d’un système LC-MS/MS Q-TRAP modèle API-2000 équipé d’une source à nébuliseur chauffé et utilisant le logiciel Analyst (Applied Biosystems).
La teneur totale en composés phénoliques a été déterminée par spectrophotométrie selon la méthode de Folin-Ciocalteu avec de légères modifications. Brièvement, 1,0 mL d’échantillons convenablement dilués, de solutions de calibration ou de solution témoin ont été pipetés dans des tubes à essai séparés (20 mL) et 1,0 mL de réactif de Folin-Ciocalteu a été ajouté à chacun. Le mélange a été bien homogénéisé et laissé à équilibrer. Après exactement 10 min, 10 mL d’eau milliQ et 3,0 mL de solution de Na₂CO₃ (w = 5 %) ont été ajoutés et le volume a été complété avec de l’eau milliQ. Le mélange a été agité par tourbillonnement et placé dans un bain-marie à 40 °C pendant 20 min. Ensuite, les tubes ont été rapidement refroidis sur glace, et la couleur générée a été lue à son absorption maximale. Les mesures ont été comparées à une courbe étalon de solutions d’acide gallique préparées (50, 100, 150, 250 et 500 mg L⁻¹) et exprimées en milligrammes d’équivalents d’acide gallique. Toutes les mesures ont été réalisées en triplicat, l’absorbance a été mesurée dans des cuves de 1 cm, et pour les solutions de calibration et la préparation du témoin, une solution méthanolique à la même concentration que les échantillons a été utilisée.
Une analyse préliminaire a été réalisée pour identifier les principaux constituants de la plante entière de P. lanceolata. Des flavonoïdes, des coumarines, des lipides, des acides cinnamiques, des lignanes et des composés phénoliques sont présents dans les infusions de P. lanceolata [ Tableau 1 ].
L’infusion à l’eau chaude du P. lanceolata entier (fleurs, feuilles et racines) contient différentes classes de composés phénoliques, notamment des flavonoïdes, des coumarines, des lipides et des acides cinnamiques à diverses concentrations [ Tableau 2 ]. Dans l’infusion lyophilisée, le niveau de composés phénoliques était de 40,5 ± 1,3 mg équiv. AG/g de matière sèche (MS), comme révélé par l’analyse HPLC. Le niveau de composés phénoliques totaux, tel que détecté par la méthode de Folin-Ciocalteu, était plus élevé (89,0 ± 2,5 mg équiv. AG/g MS) ; cette différence peut s’expliquer par la présence de protéines, d’acide ascorbique ou de sucres réducteurs dans P. lanceolata, qui contribuent à des valeurs de Folin-Ciocalteu plus élevées. Une technique LC/MS/MS a été appliquée à l’infusion chaude préparée à partir des feuilles de P. lanceolata (rendement de 5,4 % de la masse de matière première séchée à l’air), conduisant à l’isolement de plusieurs polyphénols, dont des flavonoïdes, parmi lesquels les plus abondants étaient l’apigénine (14), la lutéoline (15) et la lutéoline-7-O-glucoside (16). La quercétine-3-rutinoside (rutine, 2), la quercétine-3-O-D-galactopyranoside (hypéroside, 3), le 3,5,7,4-tétrahydroxyflavonol (kaempférol, 4), la 3,5,7,3,4-pentahydroxyflavone (quercétine, 5) et le 3,5,3,4-tétrahydroxy-7-méthoxyflavonol (rhamnétine, 6) étaient également présents, tandis que la naringénine (17) n’était présente qu’à l’état de traces, en accord avec les données que Beara et al. (2012) ont rapportées pour les extraits méthanoliques [ Figure 1 ]. D’autres composés phénoliques de plus faible poids moléculaire ont été identifiés comme les acides vanillique (10) et gallique (1), ainsi que trois dérivés de ce dernier : le 3-O-galloyl-4,6-hexahydroxydiphénoyl-D-glucose (7), le 2,3-di-O-galloyl-D-glucose (8) et le 1,2,3-tri-O-galloyl-D-glucose (9), qui était le plus abondant. En outre, une quantité significative d’acides cinnamiques, comprenant les acides cinnamique (11), caféique (12) et chlorogénique (13), a été mesurée [ Figure 2 ].
Une infusion de fleurs et de feuilles séchées a été utilisée pour évaluer l’activité antimicrobienne in vitro de P. lanceolata, exprimée en termes de concentration minimale inhibitrice (CMI) et de concentration minimale bactéricide (CMB) [ Tableau 3 ]. Des souches appartenant à plusieurs espèces de Streptococcus, à savoir S. bovis, S. mitis, S. sobrinus, S. mutans, S. parasanguinis et S. viridans, et une souche de L. casei, isolées à partir de prélèvements cliniques, ont été sélectionnées pour le bio-essai. L’infusion de P. lanceolata a été testée à des concentrations allant de 4 à 0,025 mg/mL. La sensibilité des souches à la tisane variait considérablement ; cependant, des concentrations comprises entre 250 μg/mL et 2,0 mg/mL ont montré une activité antimicrobienne, affectant la viabilité de toutes les bactéries testées. En ce qui concerne les effets de l’infusion de P. lanceolata sur les lignées cellulaires humaines, nous avons constaté que la viabilité des deux lignées cellulaires utilisées, à savoir TK6 et U937, incubées en présence de concentrations d’extrait allant jusqu’à 4 mg/mL, ne diminue pas par rapport à leurs témoins respectifs.
Pour le groupe test, les différences de concentration en streptocoques (UFC/mL) entre T0 et T1 et entre T0 et T2 étaient significatives (P < 0,001 pour les deux) ; la différence entre T1 et T2 n’était pas significative. Les différences de concentration en lactobacilles (UFC/mL) n’étaient significatives entre aucun couple de points temporels.
Pour le groupe témoin, les différences de densité (UFC/mL) des streptocoques et des lactobacilles n’étaient pas significatives.
La différence de densité en streptocoques entre les groupes test et témoin n’était pas significative à T0 mais était significative à T1 et T2, tandis que les différences de concentration en lactobacilles n’étaient pas significatives [ Tableau 4 ].
Les infusions de P. lanceolata ont démontré une bonne activité antimicrobienne in vitro, en particulier contre les streptocoques. Le potentiel biocide de certaines espèces du genre Plantago est bien connu : les extraits de P. major, par exemple, ont provoqué de fortes altérations de la structure de la paroi cellulaire de différentes bactéries à Gram positif. De même, les extraits de P. lanceolata dans différents solvants ont présenté une activité antimicrobienne modérée, très probablement due à la présence de flavonoïdes et de terpènes. Il est intéressant de noter que les extraits aqueux de P. lanceolata ont produit les meilleurs effets antimicrobiens, présentant une activité antimicrobienne faible à modérée contre S. aureus, S. epidermidis, S. marcescens et Proteus vulgaris. De plus, Bazzaz et Haririzadeh (2003) ont rapporté que le jus pressé de P. lanceolata frais a un effet bactéricide.
Le test clinique a démontré que les sujets ayant utilisé un bain de bouche à base de P. lanceolata présentaient une diminution significative des streptocoques par rapport aux sujets traités avec le placebo, tandis que seule une légère diminution (non significative) a été observée pour les comptages de lactobacilles à la suite du traitement.
Outre les différences propres aux souches, une explication possible de la faible réduction des lactobacilles par rapport aux streptocoques est que ces derniers se développent normalement sur des surfaces exposées et facilement accessibles, tandis que les lactobacilles et les espèces apparentées se réfugient dans des zones rétentives desquamées qui ont un contact limité avec le bain de bouche.
Par ailleurs, dans la présente étude, seul l’effet à court terme (sept jours) de P. lanceolata contre les streptocoques et les lactobacilles buccaux a été évalué in vivo. Les résultats prometteurs que nous avons obtenus suggèrent que d’autres études devront être entreprises pour établir si la capacité de réduire les comptages salivaires des streptocoques mutans sera durable, et si aucune résistance n’apparaîtra. En outre, l’acceptabilité et l’observance à long terme par les patients doivent être évaluées.
La teneur en composés phénoliques et les principaux composés phénoliques de l’infusion de la plante entière, ainsi que celle des feuilles, fleurs et racines isolées de P. lanceolata, ont été déterminées. Les résultats de l’analyse ont montré que tous les extraits ont une teneur élevée en composés phénoliques. Neuf flavonoïdes, trois acides cinnamiques, deux composés à squelette C6-C1 et trois de leurs dérivés glycosylés ont été identifiés. En particulier, l’extrait de feuilles est le plus riche en polyphénols, suivi de celui des fleurs et, dans une moindre mesure, des racines. Une différence significative de la teneur en flavonoïdes a également été détectée, la teneur en flavonoïdes la plus élevée se trouvant dans l’extrait de fleurs, suivi des feuilles, tandis qu’aucun n’a été détecté dans les racines. En accord avec des études antérieures sur les constituants phénoliques de P. lanceolata, nos analyses ont également détecté la présence d’acides cinnamiques dans tous les extraits, mais le plus abondamment dans les feuilles. La teneur en coumarines était cependant inférieure à celle des autres composés phénoliques et constante dans les trois types d’extraits. En revanche, la teneur en lipides était nettement faible et seulement présente dans l’extrait de racines. Enfin, aucun lignane n’a été trouvé dans aucun des extraits analysés. L’activité antistreptococcique des infusions de P. lanceolata pourrait être liée aux substances phénoliques présentes dans l’infusion et est très probablement le résultat de l’activité synergique des nombreux composés phénoliques qui ont été isolés. Les acides chlorogénique et caféique inhibent la croissance de S. mutans, et la présence de concentrations significatives d’apigénine, un inhibiteur efficace des GTF (glucosyltransférases) de S. mutans et S. sanguinis, est également notable. L’adhérence des cellules bactériennes à la surface de la dent est importante pour le développement des lésions carieuses, et l’interférence avec les mécanismes d’adhérence peut prévenir la carie dentaire. En outre, comme le suggèrent Özan et al., les substances phénoliques trouvées dans les extraits de plantes agissent très probablement sur la membrane microbienne ou la surface de la paroi cellulaire, causant des dommages structurels et fonctionnels. Cependant, des recherches supplémentaires sont nécessaires pour identifier quel composé pur pourrait être responsable des propriétés antibactériennes et pour déterminer son potentiel d’utilisation dans les industries pharmaceutiques.
Le bain de bouche à base de P. lanceolata pourrait offrir une nouvelle option pour le contrôle microbiologique de la carie dentaire, car l’infusion est facilement obtenue, peu coûteuse et présente des effets bénéfiques. Il existe un besoin urgent d’options alternatives de prévention et de traitement qui soient sûres, efficaces et économiques, compte tenu de l’incidence des maladies buccales et des effets indésirables (comme la coloration des dents et de la langue et les troubles du goût) de certains agents antibactériens actuellement utilisés en dentisterie.
Sur la base de ces considérations, une infusion de P. lanceolata pourrait être utile comme mesure d’appoint pour contrôler la prolifération de la flore cariogène buccale. D’autres études, en particulier des études in vivo et in situ, sont nécessaires pour établir des preuves concluantes de l’efficacité de l’extrait de P. lanceolata contre la carie dentaire, seul ou en combinaison avec des thérapies conventionnelles, pour améliorer la santé bucco-dentaire.
Les auteurs déclarent qu’il n’y a aucun conflit d’intérêts.
Activité sur les bactéries buccales (S. mutans). L’étude combine trois volets : un test in vitro montrant que l’infusion de feuilles et fleurs de plantain lancéolé (Plantago lanceolata) inhibe la viabilité de six espèces de streptocoques (dont S. mutans) et d’un lactobacille à des concentrations de 250 μg/mL à 2 mg/mL, sans toxicité sur les lignées cellulaires humaines jusqu’à 4 mg/mL ; un essai clinique randomisé contrôlé (40 adolescents, bain de bouche 3×/jour pendant 7 jours) montrant une baisse significative des streptocoques salivaires (P < 0,001) chez les utilisateurs de plantain versus placebo, mais pas de réduction significative des lactobacilles ; et une analyse phytochimique identifiant les composés actifs présumés (flavonoïdes dont apigénine/lutéoline, acides cinnamiques dont chlorogénique et caféique, dérivés galloylés).
Rôle du plantain. Le plantain lancéolé agit ici comme un anticariogène naturel par effet antimicrobien, attribué à la richesse en composés phénoliques (feuilles = fraction la plus riche) agissant probablement en synergie sur la paroi/membrane bactérienne et l’adhérence.
Niveau de preuve. Modéré pour un usage d’appoint : essai clinique randomisé contrôlé mais petit effectif (n = 40), durée courte (7 jours), critère microbiologique salivaire (pas de critère carie clinique), effet démontré sur les streptocoques seulement. Les auteurs eux-mêmes appellent à des études plus longues et in situ. À considérer comme mesure complémentaire, non comme traitement établi.
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