Référence : Molecules 2021. — PMC7827761 · DOI 10.3390/molecules26020283 Type : étude clinique observationnelle + in vitro · Plante : Origan vulgaire · Propriété → Antimicrobien Accès : ⭐ libre (open access) → texte intégral traduit. Fidélité : traduction intégrale et fidèle du texte des auteurs. Appels [n] omis ; figures/tableaux « [ ] ».
Le syndrome métabolique (SM) favorise les infections aiguës et chroniques, en raison de l’état pro-inflammatoire induit par le TNFα et l’IL6 ou par l’altération du microbiote. Le SM est également corrélé à l’insulinorésistance, qui provoque une inflammation et des infections dans l’ensemble de l’organisme.
L’objectif de cette étude était de suivre l’effet de l’utilisation de l’huile essentielle d’Origanum vulgare L. (HEO) comme traitement antibactérien, comparativement au traitement allopathique par antibiotiques chez des patients atteints de SM. Un groupe de 106 personnes atteintes de SM a été divisé en quatre sous-groupes : L1 — groupe présentant une infection staphylococcique ; L2 — groupe présentant une infection à Escherichia coli ; L3 — groupe présentant une infection streptococcique et recevant un traitement par HEO ; et GC — groupe témoin sans infection ni traitement.
L’HEO est responsable de l’effet antibactérien et a réduit les infections mineures non compliquées. Après un traitement de 10 jours, les effets indésirables intestinaux étaient absents et l’angle de phase s’était amélioré.
Les résultats suggèrent que l’HEO pourrait exercer un effet antibactérien similaire à celui du traitement antibiotique, sans favoriser la dysbiose propre au SM ; elle améliore également l’angle de phase chez les patients, utilisé comme indice de santé et de fonction cellulaire.
Dans le syndrome métabolique (SM), l’inflammation chronique est provoquée par la sécrétion primaire de TNFα et d’IL6 par les cellules adipeuses. Elle est également due à l’activité secondaire de la muqueuse intestinale lorsqu’elle entre en contact avec des aliments produisant des réactions retardées de type IgG. Ce mécanisme, présenté dans [ ], active une réponse immunitaire allant des lymphocytes T au tissu lymphoïde associé. Les lymphocytes T auxiliaires régulateurs sont associés aux cytokines anti-inflammatoires (IL10) lors de leur activation ou de leur inhibition, et sont corrélés à la fois aux réactions d’intolérance alimentaire et aux maladies auto-immunes dans le SM.
Les TH3 contribuent au maintien de l’homéostasie intestinale. Les Th1 interviennent dans la réponse cellulaire contre les agents pathogènes et sont sécrétés par les macrophages avec les cytokines pro-inflammatoires. En cas de suractivation, une hypersensibilité à la réaction allergique retardée apparaît. Le diabète sucré, l’insulinorésistance et le SM font partie des maladies concernées. Les TH2 interviennent dans la réponse immunitaire à un stimulus extracellulaire, notamment par l’intermédiaire des anticorps, des protéines du complément et de certains peptides antimicrobiens. Ces cellules TH2 entraînent la sécrétion d’IL4, qui stimule à son tour les lymphocytes B afin qu’ils produisent des anticorps IgE activant les macrophages, la sécrétion d’histamine et l’inflammation ; elles sont corrélées aux réactions allergiques dermatologiques.
Plus la réaction inflammatoire est importante, plus le traitement allopathique des bactéries cytotoxiques est dévastateur, et pas uniquement au niveau des agents pathogènes, en l’occurrence Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes et Escherichia coli. Au niveau du microbiome, les effets sont encore plus dévastateurs et entraînent une aggravation de la maladie sous-jacente, c’est-à-dire du SM.
L’utilisation d’antibiotiques à large spectre entraîne l’apparition d’une résistance bactérienne, notamment dans les maladies où la cicatrisation est retardée et où le risque de surinfection est élevé. L’objectif de notre étude était d’utiliser l’huile essentielle d’Origanum vulgare L. (HEO) comme traitement antibiotique naturel alternatif, pratiquement dépourvu d’effets indésirables significatifs, procurant d’importants bénéfices aux patients atteints de SM et offrant aux médecins la possibilité de trouver différentes options thérapeutiques pour les infections aiguës mineures et non compliquées associées au SM.
Les huiles essentielles sont utilisées dans de nombreux traitements naturels anti-infectieux, antimycotiques et désinfectants, dans lesquels on trouve notamment l’HEO, l’huile de thym ou le clou de girofle. L’activité antibactérienne d’extraits naturels a été étudiée dans une étude de 2020 qui suivait l’expression de NFαB et la réponse des cytokines IL6 et TNFα, et des résultats significatifs ont été obtenus. L’activité antibactérienne ainsi que l’activité antioxydante des plantes ont été mises en évidence dans plusieurs études, aussi bien pour Origanum vulgare L. que pour d’autres espèces végétales. Notre étude a suivi des infections bactériennes de la peau, de la gorge et du tractus digestif inférieur, traitées par HEO chez des patients atteints de SM ; celle-ci s’est révélée efficace pour réduire l’infection sans altérer la flore intestinale.
La masse cellulaire totale était directement proportionnelle à la phase de bio-impact, ou angle de phase, et elle est mesurée par l’analyseur cellulaire d’impédance bioélectrique. Il s’agit d’un indicateur de la quantité de charge électrique fondé sur le rapport entre la résistance et la réactance de l’organisme que les membranes cellulaires peuvent maintenir, et utilisé comme indice de santé et de fonction cellulaire. Le suivi de ce paramètre est utile comme indicateur du catabolisme chez les patients atteints de SM et de diabète.
Chez les adultes de poids normal et en surpoids, l’angle de phase augmente avec l’augmentation de l’IMC, mais une association inverse a également été observée pour un IMC > 40 kg/m². Les valeurs de référence utilisées sont allemandes ; les essais cliniques ont porté sur 15 605 enfants et adolescents et sur 21 732 adultes, et les valeurs de référence ont été établies selon l’IMC, l’âge, le sexe et l’état de santé. Dans cette étude, une modification des valeurs de référence a été observée en cas de maladies graves, par exemple la cirrhose hépatique, dans laquelle l’angle de phase est inversement proportionnel à l’évolution de la maladie.
Plusieurs études cherchent à vérifier la prévalence de l’utilisation de l’angle de phase comme prédicteur de l’état de santé, par exemple chez les personnes dépendantes à l’alcool. L’alcoolisme est directement lié au SM et aux maladies métaboliques en raison des lésions de la muqueuse de l’intestin grêle, qui réduisent l’absorption des nutriments, des vitamines et des minéraux. Une diminution prononcée de l’angle de phase a été observée chez ces patients.
Cette étude a suivi l’activité antibactérienne de l’HEO sur des cultures standardisées de Staphylococcus aureus (ATCC 25923), d’Escherichia coli (ATCC 25922) et de Streptococcus pyogenes (ATCC 19615), présentées dans [ ]. Quatre microcompresses contenant quatre antibiotiques différents et trois quantités différentes d’HEO — 0,2, 0,4 et 0,6 μL — ont été appliquées sur les cultures microbiennes.
Dans les cultures de Staphylococcus aureus (ATCC 25923), la zone d’inhibition avait un diamètre de 25 mm pour l’azithromycine (15 μg), de 32 mm pour l’érythromycine (15 μg), de 29 mm pour la lévofloxacine (5 μg) et de 30 mm pour la tétracycline (30 μg). L’HEO a été utilisée en trois quantités différentes : 0,2, 0,4 et 0,6 μL. Un diamètre minimal de zone d’inhibition de 33 mm a été obtenu pour toutes les quantités utilisées, comme présenté dans [ ] et [ ].
Dans les cultures d’Escherichia coli (ATCC 25922), la zone d’inhibition avait un diamètre de 23 mm pour l’azithromycine (15 μg), de 24 mm pour l’ampicilline (10 μg), de 33 mm pour la lévofloxacine (5 μg) et de 29 mm pour la tétracycline (30 μg). Pour l’HEO, un diamètre de zone d’inhibition de 33 mm a été obtenu pour toutes les quantités utilisées.
Dans les cultures de Streptococcus pyogenes (ATCC 19615), la zone d’inhibition avait un diamètre de 27 mm pour l’ampicilline (10 μg), de 30 mm pour l’érythromycine (15 μg), de 30 mm pour la lévofloxacine (5 μg) et de 31 mm pour la tétracycline (30 μg). Pour l’HEO, un diamètre minimal de 31 mm a été obtenu pour toutes les quantités utilisées, comme présenté dans [ ] et [ ]. Les résultats de cette étude montrent l’activité antibactérienne prononcée de l’HEO.
Trois quantités différentes d’HEO — 0,2, 0,4 et 0,6 μL — ont été utilisées pour déterminer la concentration minimale inhibitrice (CMI). La quantité de 0,2 μL était celle qui produisait un diamètre supérieur à celui obtenu avec l’antibiotique le plus actif. En conclusion, nous avons mis en évidence l’activité antibactérienne de l’HEO sur les cultures bactériennes. Nous avons obtenu une zone d’inhibition supérieure à 33 mm avec 0,2 μL d’HEO, dépassant celle de l’antibiotique le plus actif. L’utilisation de 0,2 μL d’HEO était donc justifiée, car, à cette concentration, la zone d’inhibition de toutes les cultures bactériennes était supérieure à celle de l’antibiotique le plus actif.
[ ] et [ ] présentent les résultats concernant la relation entre les phases de prétest et de post-test dans le groupe L1. Nous avons obtenu un coefficient de Pearson r = −0,268, p < 0,001, indiquant une relation statistiquement significative. À la fin de la période de suivi, le nombre d’infections était inférieur au nombre initial. Cette relation ressort de la valeur négative du coefficient de Pearson, mais également d’une valeur de significativité statistique inférieure à 0,05.
Concernant la relation entre les phases de prétest et de post-test dans le groupe L2, nous avons obtenu un coefficient de Pearson r = −0,208, p < 0,05, indiquant une relation statistiquement significative. À la fin de la période de suivi, le nombre d’infections était inférieur au nombre initial. Cette relation ressort de la valeur négative du coefficient de Pearson, mais également d’une valeur de significativité statistique inférieure à 0,05.
Pour la relation entre les phases de prétest et de post-test dans le groupe L3, nous avons obtenu un coefficient de Pearson r = −0,207, p < 0,05, indiquant une relation statistiquement significative. À la fin de la période de suivi, le nombre d’infections était inférieur au nombre initial. Cette relation ressort de la valeur négative du coefficient de Pearson, mais également d’une valeur de significativité statistique inférieure à 0,05.
Nous avons étudié les paramètres gastro-intestinaux au moyen de trois variables : diarrhée, douleur gastro-intestinale et flatulence. Nous avons utilisé l’analyse statistique de Pearson.
Dans le cas de la diarrhée, comme présenté dans [ ], après le traitement de l’infection à Staphylococcus aureus, une tendance à la diminution pouvait être observée à la fin de la période thérapeutique par HEO. La corrélation entre les deux paramètres est également reflétée par l’analyse statistique de Pearson, avec un coefficient r = −0,277 (p = 0,007). Ces résultats indiquent une forte relation entre la diminution de l’infection à Staphylococcus aureus à la fin de la période thérapeutique et l’incidence de la diarrhée.
Dans le cas de la douleur gastro-intestinale associée aux infections staphylococciques, présentée dans [ ] et traitée par HEO, une corrélation directement proportionnelle pouvait être observée à la fin du traitement (coefficient de Pearson r = −0,292, p = 0,002), c’est-à-dire que la douleur gastro-intestinale diminuait en même temps que l’infection staphylococcique. Ce résultat peut s’expliquer par les propriétés positives de l’HEO, qui ne détruit pas la flore intestinale, mais la régule.
À partir de la corrélation entre la différence concernant l’infection à Staphylococcus aureus et la différence concernant la flatulence, présentée dans [ ], nous avons obtenu un coefficient de Pearson r = −0,302 (p < 0,001), statistiquement significatif, montrant un lien étroit puisque les deux paramètres étaient corrélés de manière directement proportionnelle.
Concernant l’incidence de la diarrhée après le traitement de l’infection à Escherichia coli, [ ] montre qu’à la fin de la période thérapeutique par HEO, l’infection à Escherichia coli et la diarrhée tendaient toutes deux vers « 0 ». La corrélation entre les deux paramètres est reflétée par l’analyse statistique de Pearson. Nous avons obtenu un coefficient r = −0,366 (p = 0,001), indiquant une forte relation entre la diminution de l’infection à E. coli à la fin de la période thérapeutique et l’incidence de la diarrhée.
En tant que traitement naturel des infections à E. coli, l’HEO s’est révélée efficace, sans effet négatif sur le microbiome, d’après l’évaluation de la douleur gastro-intestinale présentée dans [ ] et de la flatulence présentée dans [ ]. L’analyse statistique a donné un coefficient de Pearson r = −0,174, p = 0,06, pour la douleur gastro-intestinale et r = −0,224 (p = 0,01) pour la flatulence, ce dernier résultat reflétant une forte significativité statistique positive.
L’incidence de la diarrhée après le traitement de l’infection à Streptococcus pyogenes est présentée dans [ ] ; à la fin de la période thérapeutique par HEO, l’infection à Streptococcus pyogenes et la diarrhée tendaient toutes deux vers « 0 ». La corrélation entre les deux paramètres est également reflétée par l’analyse statistique de Pearson, avec un coefficient r = 0,135 (p > 0,05), indiquant une relation positive, mais sans significativité statistique, bien que toutes les infections se soient améliorées sous traitement par HEO. Ce résultat peut s’expliquer par le nombre insuffisant de cas étudiés, avec deux cas initiaux.
[ ] présente la relation entre la douleur gastro-intestinale en cas d’infection à Streptococcus pyogenes et le traitement par HEO, avec un coefficient de Pearson r = −0,224, p = 0,01, qui montre une relation fortement positive et statistiquement significative. Dans le cas de la flatulence associée à la différence concernant l’infection à Streptococcus pyogenes, présentée dans [ ], une relation directement proportionnelle pouvait être observée, mais elle n’atteignait pas le seuil de significativité, le coefficient de Pearson étant r = 0,21, p > 0,05.
Après l’évaluation initiale et finale des patients, une amélioration statistiquement significative de l’angle de phase pouvait être observée. Le coefficient du test t de Student pour la comparaison de deux échantillons indépendants — évaluations initiale et finale — était t = −8,108, p < 0,001. Les seuils de significativité indiquaient une augmentation de l’angle de phase chez tous les patients, comme présenté dans [ ]. Pour chacun des groupes analysés, les observations suivantes ont été faites :
aucune modification n’a été enregistrée dans le groupe témoin (t = 1 000, p = 0,330) ;
une amélioration a été enregistrée dans le groupe L1 : t = −10,020, p < 0,01 ;
dans le groupe L2, une amélioration significative, reflétée par la valeur t = −8,099, p < 0,01, pouvait être observée ;
dans le groupe L3, t = −6,205, p < 0,01, indiquant une modification statistiquement significative.
Le microbiote joue un rôle important non seulement dans la prise en charge du SM et de l’inflammation chronique, mais il entretient également une relation directe avec les systèmes immunitaire et neuroendocrinien ainsi qu’avec les systèmes nerveux autonome et central. Les risques de maladie cardiovasculaire et de diabète de type 2 associés au SM, ainsi que l’apparition d’une résistance bactérienne lors des infections, augmentent le risque de mortalité.
De nombreuses études suivent l’évolution des patients atteints de SM, en raison de la tendance à l’augmentation du nombre de cas, notamment sous l’angle des maladies associées, de l’obésité abdominale ou de la corrélation entre l’état nutritionnel et la stéatose hépatique. D’après une étude publiée en 2019, certaines plantes favorisent l’obésité, mais n’influencent pas l’apparition de l’insulinorésistance lorsqu’elles sont administrées pendant six semaines chez le rat. De nombreuses études mettent en évidence l’effet rééquilibrant de l’HEO au niveau intestinal.
Notre étude a porté sur le traitement des infections mineures par HEO à la place du traitement allopathique ; ce traitement n’a donc pas aggravé la flatulence, les douleurs gastro-intestinales ou la diarrhée, qui constituent des signes de destruction de la microflore intestinale. Le tissu lymphoïde associé à l’immunité intestinale, appelé immunité innée, joue un rôle important dans la défense de l’organisme contre les infections. En ce qui concerne le stress oxydatif associé au syndrome métabolique et au diabète, il est également possible d’intervenir à l’aide de plantes.
En 2016, Andersen et ses collaborateurs ont mis en évidence l’effet de l’obésité sur la réponse immunitaire aux agents pathogènes, ainsi qu’une perturbation de la fonction du tissu lymphoïde associé due au tissu adipeux. La diminution de l’activité des neutrophiles provoquée par le SM et l’obésité augmente la sensibilité aux infections à Staphylococcus aureus. Nous avons obtenu un résultat comparable avec le traitement par HEO à la place des antibiotiques dans les infections mineures à Staphylococcus sp. Celui-ci a permis le fonctionnement normal du système immunitaire dans le tractus intestinal.
Le SM étant corrélé à l’hypercoagulation, il joue un rôle déterminant dans la prise en charge des infections à Streptococcus pyogenes, par l’intermédiaire de la formation de fibrine. Les infections à Streptococcus pyogenes sont moins nombreuses, ce qui se reflète dans le nombre de patients inclus dans l’étude pour cette infection. Les résultats sont néanmoins encourageants et nous permettent de proposer des études plus longues portant sur un groupe de patients plus important.
Les infections à E. coli ont constitué un problème majeur, en particulier au cours de la dernière décennie. Les personnes concernées sont celles dont l’immunité est plus faible, notamment les personnes atteintes de SM, en raison d’une altération du tissu lymphoïde. Le traitement des infections à un stade précoce par des antibiotiques naturels s’est révélé efficace dans le groupe L2 présentant des infections à E. coli, avec également une cytotoxicité inférieure à celle du traitement allopathique.
L’HEO est utilisée en raison de ses multiples effets bénéfiques sur la santé humaine, mais également comme traitement prophylactique à fort potentiel dans l’industrie agroalimentaire, où elle remplace les antibiotiques administrés aux oiseaux. Des études menées en 2019 sur des infections à Staphylococcus aureus sous forme résistante ont observé une activité inhibitrice de l’HEO. Chez les patients atteints de SM, la dose minimale efficace réduit les effets indésirables et les interactions médicamenteuses.
Le carvacrol, qui est l’un des principaux composants de l’HEO, active les canaux TRPA1 et TRPV3 des récepteurs à potentiel transitoire (TRP) et produit une vasodilatation endothéliale. Cet effet cardioprotecteur augmente l’intérêt de son utilisation chez les personnes atteintes de SM. L’HEO s’est révélée efficace dans le traitement de la pharyngite associée aux infections à Streptococcus pyogenes. Les concentrations minimales efficaces entraînant la destruction de la paroi bactérienne sont étudiées dans plusieurs populations d’agents pathogènes afin d’évaluer l’activité des huiles essentielles.
Le traitement appliqué aux patients présentant des infections mineures a été suivi et évalué non seulement d’un point de vue symptomatologique, mais également quant à sa corrélation avec les effets indésirables des antibiotiques chez les personnes atteintes de SM. Des traitements alternatifs appartenant à la classe des céphalosporines, notamment le cefmétazole, ont été étudiés, et la fosfomycine a été comparée à la ciprofloxacine ; toutefois, les effets indésirables des antibiotiques augmentent avec l’étendue du spectre d’activité et la résistance bactérienne.
Les infections urinaires et vaginales provoquées par Escherichia coli ont été traitées avec succès par HEO. Chez les patients atteints de SM inclus dans la présente étude, l’HEO a inhibé le développement d’Escherichia coli et amélioré la santé gastro-intestinale, ce qui ne peut pas être obtenu avec un traitement allopathique. Concernant la corrélation entre les troubles gastro-intestinaux et le traitement des infections à E. coli, une corrélation forte et statistiquement significative a été constatée, ce qui peut également s’expliquer par le grand nombre de participants dans le groupe L2. Les résultats améliorés, mais statistiquement non significatifs, du groupe L3 peuvent s’expliquer par le faible nombre de participants à l’étude ; néanmoins, ces résultats positifs nous encouragent à élargir l’étude à l’avenir.
L’angle de phase, composante du suivi de l’état de santé pendant la convalescence, est un prédicteur important, mais également un indicateur du catabolisme dans le diabète de type 2. Le SM est corrélé à l’insulinorésistance chez les personnes obèses. Dans notre étude, nous pouvons suivre l’évolution positive de l’angle de phase dans les trois groupes de recherche. Cette détermination de l’angle de phase revêt une importance particulière pour le suivi des fonctions cellulaires. Premièrement, elle peut être réalisée de manière non invasive et, deuxièmement, elle permet d’observer le déclin cellulaire avant qu’un seuil critique soit atteint.
Cette étude a été réalisée avec l’accord de la commission d’éthique de la recherche de la Faculté de médecine et de pharmacie de l’Université d’Oradea, no 12/01.04.2019. Avant l’inclusion d’un patient dans l’étude, le chercheur a expliqué le protocole de l’étude à chaque patient candidat au moyen d’une brochure et d’un formulaire de consentement éclairé. Chaque patient a fourni son consentement éclairé écrit avant de participer à l’étude.
L’espèce végétale médicinale Origanum vulgare L. (famille des Lamiaceae) a été utilisée dans notre étude. Les échantillons végétaux provenaient de zones non polluées de flore cultivée à Oradea, dans le județ de Bihor, en Roumanie, et ont été soigneusement récoltés et sélectionnés en 2018. Un spécimen de l’espèce est conservé dans l’herbier pharmaceutique d’Oradea sous le code UOP 05045, au Département de pharmacie de la Faculté de médecine et de pharmacie de l’Université d’Oradea.
L’huile volatile a été obtenue par hydrodistillation. Le procédé comprend les opérations suivantes : le matériel végétal séché (25 g) est placé avec l’eau dans le ballon de distillation ; le fond du récipient est chauffé directement à la source de chaleur ; puis le mélange d’huile et de vapeur d’eau est recueilli par condensation dans un système de refroidissement. Le distillat est ensuite transféré dans un récipient collecteur. Une séparation des phases a été observée ; l’huile essentielle (4–5 mL) a alors été recueillie par décantation, comme présenté dans [ ].
L’HEO obtenue à partir d’Origanum vulgare L. par hydrodistillation a été diluée à 1:1 avec Oleum Helianti, afin de réduire la cytotoxicité jusqu’au niveau efficace le plus faible.
La vérification de la composition centésimale de l’HEO a été réalisée au moyen d’un chromatographe en phase gazeuse couplé à la spectrométrie de masse. La capacité et la haute résolution nécessaires pour fournir des données qualitatives et quantitatives précises et exactes ont fait de la chromatographie en phase gazeuse (CPG) couplée à la spectrométrie de masse (SM), c’est-à-dire des analyses CPG-SM, une méthode précieuse pour les recherches taxonomiques sur les plantes. Les quantités relatives des différents constituants volatils des deux échantillons ont été exprimées en pourcentage de l’aire du pic par rapport à l’aire totale des pics. Les pourcentages relatifs ont été calculés informatiquement à partir du chromatogramme ionique total.
Les molécules neutres sont éluées de la colonne analytique et ionisées dans la source d’ions afin de produire des ions moléculaires susceptibles de se dégrader en ions fragments. Les ions fragments et moléculaires sont ensuite séparés dans l’analyseur de masse en fonction de leur rapport masse/charge (m/z), puis détectés. Cette méthode est utilisée pour identifier les analytes inconnus et déterminer les propriétés structurelles et chimiques des molécules ; elle produit également un chromatogramme utilisable pour les analyses qualitatives et quantitatives.
L’analyse CPG-SM de différents extraits organiques bruts isolés des feuilles d’Origanum vulgare L. a été réalisée à l’aide d’un appareil Thermo GC-MS (modèle Trace 1310 ISQ 7000) équipé d’une colonne capillaire HP-5MS de 30 m de longueur, de 0,32 mm de diamètre interne et de 0,25 µm d’épaisseur de film. Pour la détection spectroscopique par CPG-SM, un système d’ionisation électronique utilisant une énergie d’ionisation de 70 eV a été employé. L’hélium a été utilisé comme gaz vecteur à 30 cm·s⁻¹ et le volume d’injection était de 1 µL. Les températures de la ligne de transfert de masse et de l’injecteur étaient respectivement réglées à 220 °C et 290 °C. La température du four était programmée à 45 °C pendant 1 min, puis augmentée jusqu’à 250 °C à raison de 5 °C·min⁻¹ et maintenue à 250 °C pendant 5 min. Des échantillons dilués à 1/100 (v/v) dans le dichlorométhane, d’un volume de 1 µL, ont été injectés en mode avec division selon un rapport de division de 120:1. Le pourcentage relatif des constituants chimiques des extraits secs d’Origanum vulgare L. a été exprimé sous la forme d’un pourcentage obtenu par normalisation de l’aire des pics.
Une analyse qualitative et semi-quantitative a été appliquée à l’huile obtenue et les indices de rétention de Kovats ont été calculés. Les indices de rétention sont également utilisés pour caractériser la sélectivité des phases stationnaires, pour l’analyse structurale et pour l’étude des propriétés physico-chimiques des phases stationnaires et des analytes. Les relations entre les indices de Kovats et les propriétés thermodynamiques sont utilisées pour déterminer les pressions de vapeur, les entropies d’adsorption, les enthalpies et la vaporisation de différents analytes. Le résultat obtenu après l’analyse est détaillé dans [ ]. D’après les résultats présentés dans [ ], le carvacrol est la substance principale, avec une teneur de 29,22 %.
La formule des indices de rétention de Kovats (IR) est :
IR = 100(n) + 100(m − n) × (trᵢ − trₙ)/(trₘ − trₙ)
où :
IR = indice de rétention de « i » ;
i = constituant de l’huile essentielle en cours d’analyse ;
n = nombre d’atomes de carbone de l’alcane élué avant « i » ;
m = nombre d’atomes de carbone de l’alcane élué après « i » ;
trᵢ = temps de rétention de « i » ;
trₙ = temps de rétention de l’alcane élué avant « i » ;
trₘ = temps de rétention de l’alcane élué après « i ».
L’activité antimicrobienne de l’huile essentielle d’Origanum vulgare L. a été évaluée par la méthode de diffusion sur disque selon la méthodologie standard et par détermination des concentrations minimales inhibitrices (CMI). Dans notre étude, nous avons utilisé les cultures bactériennes et souches microbiennes de référence suivantes : Staphylococcus aureus (ATCC 25923), Streptococcus pyogenes (ATCC 19615) et Escherichia coli (ATCC 25922), provenant de Microbiologics, St. Cloud, Michigan, États-Unis.
Pour le test de diffusion sur disque de Kirby-Bauer, la gélose Mueller-Hinton (Oxoid) a été utilisée pour Staphylococcus aureus et Escherichia coli, tandis que le milieu gélosé Mueller-Hinton 2 additionné de 5 % de sang de mouton (BioMérieux, Marcy-l’Étoile, France) a été utilisé pour Streptococcus pyogenes.
Le milieu de culture est un milieu solide de gélose Mueller-Hinton formant une couche uniforme de 4 mm, conservée à 4 °C pendant sept jours au maximum, et ensemencée avec une culture bactérienne.
Les disques contenant les antibiotiques sont placés à la surface du milieu.
L’antibiotique diffuse dans le milieu, selon une diminution constante du gradient de concentration depuis le bord du disque jusqu’à la périphérie.
Après incubation, deux zones distinctes sont délimitées : une zone dans laquelle la croissance bactérienne est inhibée par la concentration d’antibiotique et une zone de croissance dans laquelle la concentration d’antibiotique est trop faible pour inhiber la croissance.
Plus le diamètre de la zone d’inhibition est grand, plus la bactérie est sensible et plus la CMI est faible.
Chaque souche a été déposée sur le milieu de culture approprié au moyen d’un écouvillon de coton stérile et d’un écouvillon plat, puis les plaques ont été séchées pendant 10 à 15 min.
L’huile extraite a été diluée à 1:1 avec Oleum Helianti, ou huile de tournesol (HiMedia Laboratories, Einhausen, Allemagne). À l’aide d’une micropipette, 0,2, 0,4 et 0,6 μL du mélange d’HEO ont été déposés sur les plaques inoculées.
Après une incubation d’une nuit à 37 °C, le diamètre des zones d’inhibition a été mesuré en millimètres. Des microcomprimés contenant des antibiotiques standards ont été utilisés comme témoins positifs pour chaque souche : pour Staphylococcus aureus, l’azithromycine (15 μg), l’érythromycine (15 μg), la lévofloxacine (5 μg) et la tétracycline (30 μg) ont été utilisées ; pour Escherichia coli, l’azithromycine (15 μg), l’ampicilline (10 μg), la lévofloxacine (5 μg) et la tétracycline (30 μg) ont été utilisées ; pour Streptococcus pyogenes, l’ampicilline (10 μg), l’érythromycine (15 μg), la lévofloxacine (5 μg) et la tétracycline (30 μg) ont été utilisées. Chaque test a été réalisé en trois exemplaires et les valeurs moyennes ont été retenues.
La concentration minimale inhibitrice (CMI) est définie comme la concentration la plus faible d’un médicament capable d’inhiber la croissance naturelle d’un organisme après une incubation d’une nuit. Trois quantités différentes d’HEO — 0,2, 0,4 et 0,6 μL — ont été utilisées pour déterminer la concentration minimale inhibitrice.
Nous avons évalué le diamètre le plus important obtenu avec l’antibiotique le plus actif afin d’établir l’efficacité minimale de l’HEO correspondant à la CMI.
L’étude a été menée auprès de 106 patients âgés de plus de 18 ans. L’âge moyen était de 37,42 ans (± 14,12). Les patients étaient répartis en quatre groupes :
GC = patients du groupe témoin sans infection (n = 20) ;
L1 = patients présentant une infection à Staphylococcus (n = 32) ;
L2 = patients présentant une infection à Escherichia coli (n = 51) ;
L3 = patients présentant une infection à Streptococcus (n = 2).
Tous les patients avaient reçu un diagnostic de SM, sans infection dans le groupe GC, et présentaient des infections mineures non compliquées à Staphylococcus aureus (L1), Escherichia coli (L2) ou Streptococcus pyogenes (L3), qui constituaient le critère d’inclusion.
Les critères d’exclusion étaient la présence d’infections provoquées par des souches autres que les trois étudiées et/ou la présence d’autres infections majeures ou compliquées.
Tous les patients inclus dans l’étude ont accepté le traitement naturel sans traitement allopathique. Ils ont reçu 0,8 mL, soit deux gouttes, d’HEO deux fois par jour pendant dix jours.
Nous avons mené une étude transversale auprès de patients atteints de SM inclus dans une étude de cohorte, afin d’obtenir les caractéristiques cliniques des patients atteints de SM et d’adapter la thérapie diététique à chaque patient. L’évaluation clinique a été réalisée à l’aide de l’analyseur corporel d’impédance bioélectrique Tanita MC780MA (Tokyo, Japon), et les résultats ont été évalués au moyen du logiciel médical GMON 3.4.1 (Chemnitz, Allemagne). Les analyseurs corporels de type BIA sont des dispositifs acceptés par la WPHNA (World Public Health Nutrition Association) et ont été utilisés pour déterminer la composition corporelle avec une grande précision. La marge d’erreur était de 0,1 kg.
Nous avons suivi l’évaluation de l’affinité pour la thérapie diététique à l’aide du dispositif médical non invasif Cnoga MTX (Or-Akiva, Israël), qui a permis de suivre les modifications globales des paramètres cliniques en contrôlant la saturation en oxygène, la pression artérielle et le pH sanguin.
Nous avons suivi les variations dans les quatre groupes indépendants en fonction du sexe, de l’âge, du milieu rural ou urbain, ainsi que de paramètres cliniques tels que la BAM, le statut pondéral, la masse grasse, la graisse viscérale, l’état d’hydratation (ECW/TBW), l’indice de sarcophagie, l’angle de phase, le métabolisme basal (BMR) et le pH, dans le cadre du suivi du SM.
Les participants ont rempli les fiches d’évaluation des patients inclus dans l’étude de recherche au début et à la fin de la période d’étude.
La masse cellulaire totale était directement proportionnelle à la phase de bio-impédance, ou angle de phase, et elle a été mesurée au moyen de l’analyseur corporel d’impédance bioélectrique. Les patients ont été évalués avec ce dispositif au début et à la fin du traitement. Pieds nus, ils montaient sur le socle de la balance et tenaient deux électrodes dans leurs mains. Les mesures duraient jusqu’à 10 s, après quoi les résultats étaient évalués.
Ces résultats permettaient de constater une amélioration ou une détérioration. Leur analyse dans le logiciel statistique SPSS 22 (New York, New York, États-Unis) permettait de suivre à la fois le résultat final par rapport aux valeurs initiales et les corrélations éventuelles entre l’état de santé, mesuré par l’angle de phase, et la guérison des infections chez les patients atteints de SM.
Afin d’évaluer l’état gastro-intestinal concernant la diarrhée, la flatulence et la douleur gastro-intestinale, les patients ont rempli un formulaire d’évaluation au début et à la fin de la période d’étude. Sur cette fiche, « 0 » indiquait l’absence de symptômes et « 1 » leur présence.
La diarrhée a été suivie pendant le traitement en tant que signe de dysbiose corrélé à l’utilisation d’antibiotiques. Elle était enregistrée lorsque les patients présentaient trois selles consécutives de consistance molle. Ce paramètre a été suivi pendant toute la durée du traitement par HEO.
La flatulence, présente comme problème associé au SM, était surveillée lorsqu’elle différait de celle observée avant le début du traitement ou lorsqu’elle apparaissait pendant cette période. Nous avons également suivi la flatulence associée au SM au moyen du formulaire d’évaluation rempli au début et à la fin du traitement, « 0 » indiquant l’absence de symptômes et « 1 » leur présence.
La douleur gastro-intestinale a été évaluée pendant le traitement à l’aide d’échelles adaptées — échelle visuelle analogique (EVA), échelle numérique (NRS) et échelle verbale (VRS) — en tant que signe de dysbiose corrélé à l’utilisation d’antibiotiques. Pendant le traitement par HEO, la fiche d’étude était remplie au début et à la fin du traitement, « 0 » indiquant l’absence de symptômes et « 1 » la présence de douleur.
Le taux de sortie des personnes incluses dans l’étude était de 0,00 %. Avec le test du χ², nous avons donc obtenu des groupes présentant une significativité statistique, Sig. asymptotique < 0,05. SPSS Statistics 22 a été utilisé pour réaliser l’analyse statistique. Les valeurs moyennes de tous les paramètres, les intervalles de fréquence et les écarts-types, ainsi que les tests de significativité statistique, ont été calculés à l’aide du test t de Student. Les groupes présentaient une distribution similaire à la distribution normale, selon des hypothèses portant sur les données numériques.
Le coefficient de corrélation de Bravais-Pearson a été utilisé pour calculer un indicateur indépendant des unités de mesure des deux variables. La valeur p < 0,05 a été retenue comme seuil de significativité statistique pour l’ANOVA, tandis que p < 0,01 indiquait une significativité statistique élevée. Une analyse post hoc de Bonferroni a été utilisée pour analyser les différences entre les groupes, en complément de l’analyse des sous-groupes.
L’HEO est active sur des bactéries telles que Staphylococcus aureus, Escherichia coli et Streptococcus aureus. La concentration minimale inhibitrice n’ayant aucun effet cytotoxique, elle peut être recommandée pour les infections mineures chez les patients atteints de SM.
Avec le traitement naturel par HEO, l’état des patients atteints de SM et d’infections mineures à Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes et Escherichia coli s’est amélioré, sans altération significative du microbiome intestinal. L’évaluation de la diarrhée, de la douleur gastro-intestinale et de la flatulence a montré que presque tous les paramètres s’étaient améliorés de manière statistiquement significative.
Lors du traitement par HEO des infections mineures chez les patients atteints de SM, la phase s’est également améliorée, indiquant une amélioration de l’état de santé et des fonctions cellulaires. Des études supplémentaires, des périodes d’étude plus longues et un plus grand nombre de patients sont toutefois nécessaires afin de déterminer les mécanismes exacts qui sous-tendent les effets de l’HEO.
Cette étude transversale observationnelle associée à des essais in vitro, menée chez 106 adultes atteints de syndrome métabolique — dont 32 avec une infection à Staphylococcus, 51 à Escherichia coli, 2 à Streptococcus et 20 témoins sans infection — rapporte qu’une HEO d’Origanum vulgare L. diluée à 1:1, administrée à raison de 0,8 mL (deux gouttes) deux fois par jour pendant 10 jours, était associée à une diminution des infections mineures à Staphylococcus aureus, E. coli et Streptococcus pyogenes, à l’amélioration de presque toutes les mesures de diarrhée, douleur gastro-intestinale et flatulence ainsi que de l’angle de phase, tandis qu’in vitro 0,2, 0,4 et 0,6 μL produisaient des zones d’inhibition minimales de 33 mm pour S. aureus, de 33 mm pour E. coli et de 31 mm pour S. pyogenes ; ces résultats constituent un niveau de preuve préliminaire observationnel et in vitro nécessitant des études plus longues et de plus grande taille.
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